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WB結(jié)果中無信號(hào)或顯示信號(hào)弱可能的原因及建議
日期：2025-06-16 00:41
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摘要：
WB結(jié)果中無信號(hào)或顯示信號(hào)弱可能的原因及建議：
①你所檢測(cè)的樣本中不表達(dá)目的蛋白，選擇表達(dá)量高的細(xì)胞作為陽(yáng)性對(duì)照，用于確定檢測(cè)樣本是否為陰性，同時(shí)查閱文獻(xiàn)。
②檢測(cè)樣本低表達(dá)目的蛋白，提高上樣量，裂解液中注意加入蛋白酶抑制劑。
③轉(zhuǎn)移不完全或過轉(zhuǎn)移，可以用麗春紅染膜并結(jié)合染膠(考馬斯亮藍(lán))后確定條帶是否轉(zhuǎn)至膜上或轉(zhuǎn)移過頭；適當(dāng)調(diào)整轉(zhuǎn)膜的時(shí)間和電流。
④抗體不能識(shí)別測(cè)試種屬的相關(guān)蛋白，購(gòu)買抗體前應(yīng)當(dāng)認(rèn)真閱讀抗體說明書，確定其是否能夠交叉識(shí)別測(cè)試種屬的對(duì)應(yīng)蛋白。
⑤一抗孵育時(shí)間不足，建議4℃結(jié)合過...
WB結(jié)果中無信號(hào)或顯示信號(hào)弱可能的原因及建議：
①你所檢測(cè)的樣本中不表達(dá)目的蛋白，選擇表達(dá)量高的細(xì)胞作為陽(yáng)性對(duì)照，用于確定檢測(cè)樣本是否為陰性，同時(shí)查閱文獻(xiàn)。
②檢測(cè)樣本低表達(dá)目的蛋白，提高上樣量，裂解液中注意加入蛋白酶抑制劑。
③轉(zhuǎn)移不完全或過轉(zhuǎn)移，可以用麗春紅染膜并結(jié)合染膠(考馬斯亮藍(lán))后確定條帶是否轉(zhuǎn)至膜上或轉(zhuǎn)移過頭；適當(dāng)調(diào)整轉(zhuǎn)膜的時(shí)間和電流。
④抗體不能識(shí)別測(cè)試種屬的相關(guān)蛋白，購(gòu)買抗體前應(yīng)當(dāng)認(rèn)真閱讀抗體說明書，確定其是否能夠交叉識(shí)別測(cè)試種屬的對(duì)應(yīng)蛋白。
⑤一抗孵育時(shí)間不足，建議4℃結(jié)合過夜。
⑥二抗與一抗不匹配，選擇針對(duì)一抗來源的種屬的抗體。
⑦洗膜過度，洗膜時(shí)間不宜過長(zhǎng)，加入的去垢劑不宜過強(qiáng)或過多，建議使用0.1%的弱去垢劑Tween-20。