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熒光定量PCR??擴增曲線有哪些時期
日期：2025-06-16 00:03
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摘要：
熒光定量PCR是通過檢測并記錄反應體系中熒光信號的變化來實時監測整個PCR進程。熒光定量PCR的擴增程序，以熒光染料法為例，擴增程序可分為擴增反應階段和熔解反應階段。擴增反應階段采用兩步法擴增，每一次PCR循環結束都檢測并記錄熒光信號，由此得到一條擴增曲線。
擴增曲線是描述PCR動態進程的曲線，以循環數為橫坐標，以反應過程中實時熒光信號強度為縱坐標。
擴增曲線可以分成四個時期：基線期，指數期，線性期，平臺期。
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熒光定量PCR是通過檢測并記錄反應體系中熒光信號的變化來實時監測整個PCR進程。熒光定量PCR的擴增程序，以熒光染料法為例，擴增程序可分為擴增反應階段和熔解反應階段。擴增反應階段采用兩步法擴增，每一次PCR循環結束都檢測并記錄熒光信號，由此得到一條擴增曲線。
擴增曲線是描述PCR動態進程的曲線，以循環數為橫坐標，以反應過程中實時熒光信號強度為縱坐標。
擴增曲線可以分成四個時期：基線期，指數期，線性期，平臺期。
1、基線期：擴增曲線的水平部分，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產物**量的變化。
2、指數期：PCR指數擴增期，擴增曲線起峰，每個循環的產物量與初始模板量符合指數關系，PCR產物量的對數值與起始模板量之間存在線性關系。
3、線性期：PCR反應后期，由于PCR反應體系各成分的消耗、產物抑制等因素的影響，反應效率降低，產物量與初始模板量不再符合指數關系。
4、平臺期：PCR反應停止，PCR產物不再隨循環數增加而增加。由于影響PCR擴增的因素錯綜復雜，每個反應進入平臺期的時間和平臺期的高低都各不相同。