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PCR實驗非特異性條帶擴增或條帶出現拖尾現象解決方法
日期：2025-06-16 07:22
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摘要：
PCR實驗非特異性條帶擴增或者條帶出現拖尾現象解決方法
1、當引物特異性差或引物形成二聚體時，可重新設計引物或者使用巣式PCR
2、若模板或引物濃度過高，可適當降低模板或引物濃度
3、酶量過多，則適當減少酶量
4、Mg2+濃度偏高，則降低鎂離子濃度
5、退火溫度偏低，適當提高退火溫度或使用二階段溫度法（94變性，65左右退火與延伸）
6、循環次數過多，不僅會降低擴增效率，且會使錯誤摻入率增加，因此需要減少循環次數。
PCR實驗非特異性條帶擴增或者條帶出現拖尾現象解決方法
1、當引物特異性差或引物形成二聚體時，可重新設計引物或者使用巣式PCR
2、若模板或引物濃度過高，可適當降低模板或引物濃度
3、酶量過多，則適當減少酶量
4、Mg2+濃度偏高，則降低鎂離子濃度
5、退火溫度偏低，適當提高退火溫度或使用二階段溫度法（94變性，65左右退火與延伸）
6、循環次數過多，不僅會降低擴增效率，且會使錯誤摻入率增加，因此需要減少循環次數。