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熒光染料優缺點
日期：2025-06-16 09:19
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摘要：
熒光染料也稱DNA結合染料，目前主要使用的染料分子是SYBR Green I，SYBR Green I能與DNA雙鏈的小溝特異性的結合，游離的SYBR Green I幾乎沒有熒光信號，但結合雙鏈DNA后，其熒光信號可呈數百倍的增加。隨PCR產物的增加，PCR產物與染料的結合量也增大，其熒光信號強度代表雙鏈DNA分子的數量。
熒光染料的優點：
1. 使用簡便；
2. 可以與任何PCR產物結合；
3. 價格便宜；
熒光染料的缺點：
1. 不能區分不同的雙鏈DNA
2. 引物二聚體會影響檢測的敏感性
3. 非特異性產物會影響結...
熒光染料也稱DNA結合染料，目前主要使用的染料分子是SYBR Green I，SYBR Green I能與DNA雙鏈的小溝特異性的結合，游離的SYBR Green I幾乎沒有熒光信號，但結合雙鏈DNA后，其熒光信號可呈數百倍的增加。隨PCR產物的增加，PCR產物與染料的結合量也增大，其熒光信號強度代表雙鏈DNA分子的數量。
熒光染料的優點：
1. 使用簡便；
2. 可以與任何PCR產物結合；
3. 價格便宜；
熒光染料的缺點：
1. 不能區分不同的雙鏈DNA
2. 引物二聚體會影響檢測的敏感性
3. 非特異性產物會影響結果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設計和反應條件的優化得以解決。
總的來說，SYBR Green I方法是一種*基礎也*常用的Real-time qPCR實驗手段。