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蛋白質的鹽析實驗原理
日期：2025-06-15 23:54
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摘要：蛋白質的鹽析實驗原理:
蛋白質是親水膠體，借助水化膜和同性電荷(在pH7.0的溶液中一般蛋白質帶負電荷)相互排斥作用維持蛋白質膠體的穩定，向蛋白質溶液中加入中性鹽可破壞這些穩定因素，使蛋白質沉淀析出，稱為鹽析。鹽析所得到的蛋白質沉淀經透析或用水稀釋以減低或除去鹽后，蛋白質能再次溶解并恢復其天然結構和生物活性，稱為透析。由于蛋白質分子量很大，其顆粒直徑范圍在1～100nm內，不能透過半透膜。選用合適孔徑的半透膜可使小分子物質透過，而蛋白質不能透過半透膜，從而可以除去與蛋白質混合的中性鹽及其他小分子物質。蛋白質鹽...
蛋白質的鹽析實驗原理:
蛋白質是親水膠體，借助水化膜和同性電荷(在pH7.0的溶液中一般蛋白質帶負電荷)相互排斥作用維持蛋白質膠體的穩定，向蛋白質溶液中加入中性鹽可破壞這些穩定因素，使蛋白質沉淀析出，稱為鹽析。鹽析所得到的蛋白質沉淀經透析或用水稀釋以減低或除去鹽后，蛋白質能再次溶解并恢復其天然結構和生物活性，稱為透析。由于蛋白質分子量很大，其顆粒直徑范圍在1～100nm內，不能透過半透膜。選用合適孔徑的半透膜可使小分子物質透過，而蛋白質不能透過半透膜，從而可以除去與蛋白質混合的中性鹽及其他小分子物質。蛋白質鹽析常用中性鹽，如硫酸銨、硫酸鈉、NaCl等。蛋白質經鹽析沉淀后，需脫鹽才能獲得純品。脫鹽常用的方法為透析法。由于蛋白質分子量較大，不能透過半透膜，而無機鹽及其他低分子物質可以透過，故利用透析法可將鹽析得到的蛋白質進行純化。將蛋白質溶液裝入透析袋內，袋口用線扎緊，然后將其放進蒸餾水中，蛋白質分子量大，不能透過透析袋而被截留在袋內，而小分子鹽由于透析袋內外濃度差，可透過透析袋，通過不斷更換袋外蒸餾水，直至袋內鹽分透析完為止。透析常需較長時間，為保證蛋白質不變性，透析宜在低溫下進行。
蛋白質是親水膠體，借助水化膜和同性電荷(在pH7.0的溶液中一般蛋白質帶負電荷)相互排斥作用維持蛋白質膠體的穩定，向蛋白質溶液中加入中性鹽可破壞這些穩定因素，使蛋白質沉淀析出，稱為鹽析。鹽析所得到的蛋白質沉淀經透析或用水稀釋以減低或除去鹽后，蛋白質能再次溶解并恢復其天然結構和生物活性，稱為透析。由于蛋白質分子量很大，其顆粒直徑范圍在1～100nm內，不能透過半透膜。選用合適孔徑的半透膜可使小分子物質透過，而蛋白質不能透過半透膜，從而可以除去與蛋白質混合的中性鹽及其他小分子物質。蛋白質鹽析常用中性鹽，如硫酸銨、硫酸鈉、NaCl等。蛋白質經鹽析沉淀后，需脫鹽才能獲得純品。脫鹽常用的方法為透析法。由于蛋白質分子量較大，不能透過半透膜，而無機鹽及其他低分子物質可以透過，故利用透析法可將鹽析得到的蛋白質進行純化。將蛋白質溶液裝入透析袋內，袋口用線扎緊，然后將其放進蒸餾水中，蛋白質分子量大，不能透過透析袋而被截留在袋內，而小分子鹽由于透析袋內外濃度差，可透過透析袋，通過不斷更換袋外蒸餾水，直至袋內鹽分透析完為止。透析常需較長時間，為保證蛋白質不變性，透析宜在低溫下進行。