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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:MDA-MB-435S細(xì)胞

  • 產(chǎn)品型號: BH-8010804
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
MDA-MB-435S細(xì)胞來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。
詳情介紹:

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際進(jìn)行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等; 
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。

產(chǎn)品名稱

MDA-MB-435S細(xì)胞

規(guī)格

詳見說明書

貨號

BH-8010804

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面。產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究。
②生物膜與細(xì)胞器的研究。
③細(xì)胞骨架體系的研究。
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控。
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控。
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化。
⑧細(xì)胞工程。

實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
    1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
    3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織完全被消化;
    4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
    5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、熒光鑒定:
    1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
    2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
    3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
    5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
    6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。 
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
2-甲基戊酸 標(biāo)準(zhǔn)品 2-Methylvalericacid 97-61-0 純品型,0.25G 特征形態(tài) 固態(tài)

2-甲硫基苯并噻唑 標(biāo)準(zhǔn)品 2-(Methylthio)benzothiazole 615-22-5 純品型,100MG 特征形態(tài) 固態(tài)

5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-硫醇 標(biāo)準(zhǔn)品 5-Methyl-1,3,4-thiadiazol-2-thiol 29490-19-5 純品型,100mg 特征形態(tài) 固態(tài)
β -Casomorphin (1-4) amide (bovine),Morphiceptin  α -Casein (90-95)  α -CGRP (19-37) (human)  Calcitonin (8-32)(salmon I)  Boc-VV-OH

β -Casomorphin (1-4)(bovine)  Suc-LY-AMC  Acetyl-α -CGRP (19-37)(human)  Calcitonin (salmon I)  Boc-VLGR-OH

β -Casomorphin (1-3) amide  Acetyl-Calpastatin (184-210) (human)  α -CGRP (8-37) (mouse,rat)  Calcitonin (rat)  Boc-Y-D-Ala-G-OH

β -Casomorphin (1-3)  β -CGRP (human),CGRP-II(human)  α -CGRP (8-37)(human),Calcitonin Gene- Related Peptide I (8-  Calcitonin (porcine)  Boc-PPPP-OH

β -Casomorphin (1-2)amide  α -CGRP (33-37) (canine, mouse, porcine, rat)  α -CGRP (mouse, rat)  Calcitonin (human)  Boc-PF-OH
異煙酸  Isonicotinic acid  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 地生蘭(terresial)移植維護(hù)培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑

L-蘋果酸  L-Malic acid  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 地生蘭(terresial)增殖培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑

蛋白酶K溶液(20 mg/ml)  Proteinase K Solution, 20 mg/ml  質(zhì)量規(guī)格:20 mg/ml 電擊法酵母細(xì)胞轉(zhuǎn)化試劑盒20

多聚賴氨酸0.1%溶液  Poly-L-lysine solution ( 0.1%)  質(zhì)量規(guī)格:M.W:150,000~300,000 電擊法細(xì)胞融合試劑盒10

鹽酸四環(huán)素溶液,50 mg/ml  Tetracycline  solution, 50 mg/ml, sterile  質(zhì)量規(guī)格:50 mg/ml,裝 電鏡檢測化學(xué)固著溶液10毫升

D-葡糖糖-6-二鈉二水  D-Glucose-6-phosphate, di, dihydrate  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 電鏡樣品固著液(2%Formalin固著液)50毫升

MDA-MB-435S細(xì)胞丁二酸鈉(AR)   succinate  質(zhì)量規(guī)格:AR,>99% 電鏡組織三固著液(2,4,6-imethylpyridinepuriss)50毫升

牛血紅蛋白  Hemoglobin  質(zhì)量規(guī)格:BR 電轉(zhuǎn)感受態(tài)制備試劑盒1

聚乙二醇10000  PEG 10000  質(zhì)量規(guī)格:分子量9,000~11,000 電轉(zhuǎn)印DNA南方雜交試劑盒5

DL-蘋果酸  DL-Malic acid  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 吊鐘海棠完全培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑



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