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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:MDCK細胞

  • 產(chǎn)品型號: BH-8010805
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
MDCK細胞在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
詳情介紹:

我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無**、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。產(chǎn)品僅用于科學研究

產(chǎn)品名稱

MDCK細胞

規(guī)格

詳見說明書

貨號

BH-8010805

實驗材料: 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶 
2. 100ml燒杯2個; 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個 
4、培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細胞計數(shù)板1塊; 
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把; 
8、酒精燈1臺; 

培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低  1°C。或者,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片); 
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時; 
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中; 
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及細胞化學檢測。 

實驗要點及說明 :
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)玻璃**,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
異甘草苷 HPLC≥98% 20mg JNK/SAPK(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克

異甘草素 HPLC≥98% 20mg JNK/SAPK蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25

異鉤藤堿 HPLC≥98% 20mg JNK/SAPK蛋白共沉淀分析試劑盒5

異古倫賓 HPLC≥98% 20mg Karnovsky固著液50毫升

異葒草苷 HPLC≥98% 20mg K-Ras鳥苷酸酶活性分析試劑盒6

異槲皮苷 HPLC≥98% 20mg KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDH
β -Casomorphin (1-2)  α -CGRP (32-37) (canine,mouse, porcine, rat)  (Cys(Et)2?7)-α -CGRP(human)  Des-Cys1,cyclo(Ser2-Asu7))-Calcitonin (eel), Elcatonin, (Asu  (D-Arg0,Hyp3,D-Phe7)-Bradykinin

β -Casomorphin (human)  α -CGRP (31-37) (canine, mouse, rat)  (Cys(Acm)2?7)-α -CGRP(human)  Calcitonin (eel)  Bradykinin

β -Casomorphin (bovine)  α -CGRP (30-37) (canine,mouse, rat)  α -CGRP (human), CGRP-I (human)  Calcitonin (chicken)  VW-2

RRKDLHDDEEDEAMSITA  α -CGRP (29-37) (canine,mouse, rat)  CGRP (chicken)  Caerulein (desulfated)  PTHIKWGD

RREEETEEE  (Tyr27)-α -CGRP (27-37)(canine, mouse, rat)  Calcitonin N-Terminal Flanking Peptide (human)  Caerulein, Ceruletide  Bradykinin Potentiator C
異辛醇(分析標準品,≥99.5%)  2-Ethyl-1-hexanol  質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.5% 人Agoi相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA檢測試劑盒HumanAgoiRelatedProtein,AGRPELISAKit 96T/48T

2-乙基-1,3-己二醇(標準品)  2-Ethyl-1,3-hexanediol  質(zhì)量規(guī)格:分析標準品 人alpha-1能受體(ADRA1)IgG抗體試劑盒 人alpha-1能受體(ADRA1)IgG抗體ELISA Kit

甲基磺草酮(標準品)  Mesotrione  質(zhì)量規(guī)格:分析標準品 人Alpha-D 酚/維生素E(Alpha-D TPL)試劑盒 Human Alpha-D-tocopherol,Alpha-D TPL ELISA Kit

癸酸甲酯(分析標準品,用于環(huán)境分析,≥99.5%(GC))  Methyl decanoate  質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,用于環(huán)境分析,≥99.5%(GC) 人alpha突觸核蛋白(淀粉樣前體非A4成分蛋白)低聚物(SNCA oligomer)試劑盒 Human SNCA oligomer ELISA Kit

十二酸甲酯(標準品)  Methyl laurate  質(zhì)量規(guī)格:分析標準品 人AP-5復合物β亞基(PP1030)試劑盒 human PP1030 ELISA Kit

唑(分析標準品,99.2%)   Triticonazole  質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,99.2% 人apelin 12(AP12)試劑盒 Human apelin 12,AP12 ELISA Kit

標準溶液(10μg/ml,u=6%)  Tsumacide solution  質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=6% 人apelin 13(AP13)試劑盒 Human apelin 13,AP13 ELISA Kit

嗪氨靈(標準品)  Triforin  質(zhì)量規(guī)格:分析標準品 人Apelin 36(AP36)試劑盒 Human apelin 36,AP36 ELISA Kit

三唑磷(分析標準品,>97%(HPLC))  Triazophos  質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,>97%(HPLC) 人A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)ELISA檢測試劑盒HumanaibodytogroupAseptococcalpolysaccharide,ASPELISAKit 96T/48T

蟲(分析標準品,99%)  Tebufenozide  質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,99% 人Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA檢測試劑盒HumanBcl-2associatedXprotein,BaxELISAKit 96T/48T
收到如何處理:
1、首先,觀察培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、MDCK細胞懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。

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