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我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無**、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。產品僅用于科學研究
產品名稱 |
HCT116/L細胞 |
規格 |
T25 |
貨號 |
BH-0110337 |
產品詳細 結腸癌耐奧沙利鉑耐藥株
形態特性
生長特性 貼壁生長
特征特性
培養條件 DMEM+10%FBS
傳代方法 1:2傳代
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個; 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、培養皿1個,細胞培養瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
培養細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產品說明書。
1.配制凍存培養基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數器、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度,計算凍存培養基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養基重新懸浮細胞沉淀,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低 1°C?;蛘?,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
培養操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片完全浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及細胞化學檢測。
實驗要點及說明 :
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優玻璃**,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
紅鏈霉素龍膽二糖苷 HPLC≥98% 10mg 小鼠腫瘤壞死因子受體超家族成員8(TNFRSF8)ELISA試劑盒 ,英文名: TNFRSF8 ELISA Kit
紅杉醇 HPLC≥98% 20mg 犬5羥色胺(5-HT)ELISA檢測試劑盒Canine5-Hydroxyyptamine,5HTELISAKit 96T/48T
紅松內酯 HPLC≥98% 20mg 犬水通道蛋白5(AQP5)試劑盒 Dog aquaporin-5,AQP5 ELISA kit
葒草苷 HPLC≥98% 20mg 英文名稱H
硬脂酸甲酯(>99.5%(GC),標準物質)
Methyl Stearate 質量規格:>99.5%(GC),標準物質 人γ干擾素(IFN-γ)試劑盒 Human IFN-γ ELISA Kit
亞麻酸甲酯(>98.0%(GC),標準物質) Methyl Linolenate 質量規格:>98.0%(GC),標準物質 人γ干擾素受體(IFN-γR)試劑盒 Human Ierferon γ Receptor,IFN-γR ELISA Kit
亞油酸甲酯(>99.0%(GC),標準物質) Methyl Linoleate 質量規格:>99.0%(GC),標準物質 人γ干擾素誘導單核細胞因子(MIG/CXCL9)試劑盒 Human monocyte ierferon gamma inducing factor,MIG ELISA Kit
1-十一烯(>99.5%(GC),標準物質) 1-Undecene 質量規格:>99.5%(GC),標準物質 人γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)試劑盒 Human IFI16 ELISA Kit
1-十二烯(>99.5%(GC),標準物質) 1-Dodecene 質量規格:>99.5%(GC),標準物質 人γ谷氨酸-半胱氨酸合成酶(γ-GCS)試劑盒 Human γ glamylcysteine syhetase,γ-GCS ELISA Kit
1-十三烯(>99.5%(GC),標準物質) 1-Tridecene 質量規格:>99.5%(GC),標準物質 人γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-ECS)ELISA檢測試劑盒Humanγ-glamylsysteinesyhetase,γ-ECSELISAKit 96T/48T
1-十四烯(>99.5%(GC),標準物質) 1-Tetradecene 質量規格:>99.5%(GC),標準物質 人γ-谷氨酰環化轉移酶(GGCT)試劑盒 Human GGCT ELISA Kit
1-十五烯(>99.0%(GC),標準物質) 1-Pentadecene 質量規格:>99.0%(GC),標準物質 人γ谷氨酰轉移酶(GGT)試劑盒 Human GGT ELISA Kit
1-十六烯(>99.5%(GC),標準物質) 1-Hexadecene 質量規格:>99.5%(GC),標準物質 人γ肽(Pγ)ELISA檢測試劑盒HumanPeptideγ,PγELISAKit 96T/48T
1-十七烯(>99.5%(GC),標準物質)
1-Heptadecene 質量規格:>99.5%(GC),標準物質 人κB抑制蛋白激酶(IKK)試劑盒 Human I kappa B kinase,IKK ELISA kit
人D-乳酸脫氫酶(D-LDH)酶聯吸附測定試劑盒 別稱:DLD, LDHD, Probable D-lactate
dehydrogenase,mitochondrial, Human D-LDH(D-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組D-LDH濃度
收到如何處理:
1、首先,觀察培養瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象。若有,請拍照,并及時與技術支持聯系(所拍照片將作為后續服務依據)。
2、用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養瓶蓋,將細胞置于細胞培養箱內靜置培養2-4小時,以便穩定細胞狀態。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態、所用基礎培養基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(所拍照片將作為后續服務依據);建議細胞傳代培養后,定期拍照、記錄細胞生長狀態。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養瓶內培養基,預留5ml左右繼續培養,直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內,1200rpm離心5min,離心后上清培養基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養瓶內培養,HCT116/L細胞補加培養基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續培養,直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。