產品規格：>5×105細胞數
包裝規格：1ml凍存細胞懸液或T-25培養瓶

公司所有產品均不得用于臨床診斷，僅可用于工業或科研等非醫療目的。

細胞介紹：

食管是咽和胃之間的消化管，哺乳動物的食管結構上由內向外分四層 :黏膜層、黏膜下層、肌層、外膜。其中上皮細胞主要在黏膜層，其上皮為較厚的未角化的復層扁平上皮，耐摩擦，有保護作用。在發育過程中，食管的上皮細胞增殖，由單層變為復層，使管腔變狹窄，甚至一度閉鎖，以后管腔又重新出現。在食管與胃賁門交界處，復層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。
食管損傷、從而導致食管長期的慢性炎癥、潰瘍，或慢性刺激，進而食管上皮增生，后導致癌變。實驗證明，彌漫性或局灶性上皮增生可能是食管癌的癌前期病變。在食管癌的發生中，上皮 -間質轉化( EMT)是上皮細胞來源的惡性腫瘤細胞獲得遷移和侵襲能力的重要生物學過程，有利于腫瘤轉移。

1) 細胞來源于人正常食管組織。
2) 細胞鑒定：廣譜角蛋白（PCK）免yi熒光染色為陽性。
3) 經鑒定細胞純度高于 90%。
4) 不含有  HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細jun、酵母和真jun。
5) 細胞生長方式：上皮樣，多角形細胞，貼壁培養。

我們推薦使用 Delf原代上皮細胞培養體系 作為體外培養的培養基。

視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。

注意事項：

1)原代培養的分離細胞在初次接觸體外環境時，雖然被分散成單個細胞，但它們之間的互相影響還是存在的， 而且這種影響對細胞能否存活是非常重要的。在這些細胞之間能產生一些促生長的活性物質， 使細胞彼此互相促進存活和生長。如果接種的細胞密度過低， 細胞之間的促生長作用很小， 雖然營養物質很充足， 也很難使細胞適應從體內的組織環境到被分散后進入獨立生存環境的變化過程。 如果接種的細胞密度過大，會導致營養物質供應不足， 代謝廢物積累較快需要經常換液和傳代。
2)原代培養時初始培養在組織分散和分離細胞時細胞可能會受到嚴重的損傷。適當增大原代培養接種的細胞密度， 給培養的細胞提供更多的類似于在體內時細胞之間的相互作用， 會極大提高原代培養的細胞在體外存活率。待細胞適應體外環境后進行傳代培養時再以較低的密度接種和培養。
3)由于細胞之間的相互的內在聯系被打破，分離細胞在體外培養時經歷的生存環境改變很大，在體外存活和生長的難度相應增加。 對于貼壁依賴性細胞來說，盡快使接種的細胞貼壁，是決定培養能否成功的關鍵?？梢栽诮臃N后先將培養瓶置培養箱內培養 3h 到 5h，由于細胞懸液中帶有少量培養液， 細胞即可以維持存活， 又可以很快接觸到培養瓶底壁， 是細胞迅速黏附于底物，待細胞貼壁后，再補足培養液繼續培養。
3、分離細胞培養法—懸浮型細胞培養 。

操作步驟如下：

1、剪切組織：先將所取得的組織，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手術鑷去除黏附的結締組織等非培養所需組織。再次清洗后，用手術刀將組織切成若干小塊，移入青霉素小瓶或小燒杯中，加入適量緩沖液，用彎頭眼科剪，反復剪切組織，直到組織成糊狀，約1mm3大小。靜置片刻后，用吸管吸去上層液體，加入適當的緩沖液再清洗一次。
2、消化分離：消化分離的目的是將細小的組織塊消化分離成細胞團或分散的單個細胞，以利于進一步的培養，常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養：細胞懸液用計數板進行細胞計數。用培養液將細胞數調整為（2～5）×105 cells／ml，或實驗所需密度，分裝于培養瓶中，使細胞懸液的量以覆蓋后略高于培養瓶底部為宜。置CO2培養箱內，5％CO2，37℃靜置培養。一般3～5d，原代培養細胞可以黏附于瓶壁，并伸展開始生長，可補加原培養液量1／2的新培養液，繼續培養2～3d后換液，一般7～14d可以長滿瓶壁，進行傳代。
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