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免 疫熒光技術間接法優缺點

日期:2025-06-15 00:29
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摘要: 免 疫熒光(immunofluorescence technic)以熒光物質標記抗體而進行抗原定位的技術稱為熒光抗體技術(fluorescentantibodytechnique)。用熒光物標記抗體來檢測細胞或組織中相應抗原或抗體的技術。熒光物種類一般有異硫氰酸熒光素、羅丹明熒光素、二氯三嗪基氨基熒光素等。 間接法是目前常用的方法。首先用已知未標記的抗體(第1抗體)與待檢抗原反應或用未知抗體與已知抗原反應,反應一定時間后,洗去未結合的抗體,再與標記的抗免 疫球蛋白抗體(二抗)反應。在第1步反應中,...

      免 疫熒光(immunofluorescence technic)以熒光物質標記抗體而進行抗原定位的技術稱為熒光抗體技術(fluorescentantibodytechnique)。用熒光物標記抗體來檢測細胞或組織中相應抗原或抗體的技術。熒光物種類一般有異硫氰酸熒光素、羅丹明熒光素、二氯三嗪基氨基熒光素等。


      間接法是目前常用的方法。首先用已知未標記的抗體(第1抗體)與待檢抗原反應或用未知抗體與已知抗原反應,反應一定時間后,洗去未結合的抗體,再與標記的抗免 疫球蛋白抗體(二抗)反應。在第1步反應中,若抗原抗體發生了反應,則抗體被固定在標本上,那么第2步反應中標記的抗體(二抗)必然與第1步反應形成的抗原抗體復合物中的抗體發生反應,這樣就可以通過二抗的示蹤,對標本中未知抗原或抗體進行鑒定。


其優點為:


①敏感性較高,是直接法的5-10倍;


②用一種標記的抗體,就能與一種以上的相應的抗體或抗原配合鑒定多種未知的抗原或抗體;


③既能鑒定未知抗原,又能鑒定未知抗體。


其缺點有:


①在反應中有多種因子參與,容易產生非特異性染色,結果判斷有時較困難;


②操作步驟多,費時。

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